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10×Tris-EDTA抗原修复液
产品信息
  • 产品编号:NDP-1302A
  • 产品名称:10×Tris-EDTA抗原修复液
  • 包      装:500ml
  • 单      价:¥328.00

产品简介/描述:

细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后,会导致蛋白之间的交联(cross-link),从而遮蔽样品的抗原位点,使得相当多的抗原不能与抗体很好的进行反应,导致免疫染色时染色信号减弱,甚至出现一些假阳性染色结果。因此,需要对组织/细胞进行抗原修复来逆转被掩盖的抗原表位,使其重新暴露出来,恢复抗原表位-抗体的结合能力,从而改善染色效果。

本品Tris-EDTA抗原修复液(PH:9.0)是一种常用的碱性抗原修复液,适用于大多数的抗原。经此缓冲液修复后的染色信号明显得以增强,且背景很低。本品可用于石蜡切片、冰冻切片等其他样本固定后的抗原修复。本品为10×Tris-EDTA抗原修复液,使用前需稀释成1×工作液,推荐每次配制约500ml使用液,完全浸没玻片。

注意事项:

1.   建议对第一次使用的抗体,可使用本品与0.2M (20×) Citrate Buffer(NDP-1301A)分别进行抗源修复预实验。

2.   在使用过程中穿戴实验服、口罩及一次性手套。

3.   本品使用前必须用ddH2O稀释10倍,配制成抗原修复液(1×)(PH:9.0)。修复过程中一定要使用足量的修复液(1×)来完全浸没组织切片。

4.   抗原修复通常用于醛类固定的石蜡切片,而冰冻切片由于组织比较脆弱,易在修复过程中被破坏掉,因此较少对其进行抗原修复。故对于冰冻切片,当染色效果欠佳的前提下,可考虑对其进行抗原修复。

5.   本修复液非常适用于组织抗原丰度不高或者低亲和力的抗体,当产生高背景时,可酌情高倍稀释一抗。

使用说明/方法:

1.   石蜡切片微波抗原修复:抗原修复液(1×)每次使用量约为500ml,以完全浸没玻片为宜(因加入过程中溶液会蒸发,请酌情多加修复液)。切片脱蜡后,将溶液微波高火加热至95℃-100℃后,维持温度,继续加热约20 min(最佳加热时间根据不同样品和目的蛋白自行摸索)。随后室温静置20-30 min,使其降至室温。用PBS(NDP-1201)清洗切片2-3次,每次3 min。之后进行封闭等后续的免疫染色步骤。

2.   石蜡切片高压抗原修复:玻片、修复液准备与微波修复相同。放入高压锅后,进行高压,条件为121℃,20min(最佳高压时间根据不同样品和目的蛋白自行摸索),结束后,自然冷却至高压锅压力为0(切忌使用排气阀门放气)。取出容器,随后室温静置20-30min,使其降至室温。用PBS(NDP-1201)清洗切片1-2次/3min。之后可进行封闭等后续的免疫染色步骤。



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